书名:
基因工程
作者: 常重杰
出版社: 科学出版社
版次: 1
出版日期: 2012年08月
页数: 351
定价:
48.00
元
参考重量: 0.520
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* 内容提要 *
前言
第1章绪论
1.1基因工程的基本概念
1.2基因工程的研究内容
1.3基因工程诞生的基础
1.3.1基因工程诞生的理论基础
1.3.2技术上的三大突破
1.4基因工程技术的诞生
1.5基因工程的应用
1.5.1 原核细胞基因工程
1.5.2植物基因工程
1.5.3 动物基因工程
1.5.4基因治疗
1.5.5理论研究
1.6基因工程的安全性
1.7我国的《基因工程安全管理办法》
思考题
参考文献
第2章基因工程的基本技术
2.1凝胶电泳技术
2.1.1基本原理
2.1.2琼脂糖凝胶电泳
2.1.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.1.4脉冲场凝胶电泳
2.1.5双向电泳技术
2.1.6凝胶电泳片段的回收与纯化
2.2分子杂交技术
2.2.1分子杂交的原理
2.2.2分子杂交的类型
2.3 PCR技术
2.3.1 PCR基本原理和反应过程
2.3.2 PCR反应的体系及其设计和优化
2.3.3 PCR产物的克隆
2.3.4 PCR技术的发展及其应用
2.4 DNA序列分析
2.4.1 Maxam—Gibert化学降解法
2.4.2 Sanger双脱氧链终止法
2.4.3 DNA序列分析的自动化
2.4.4 DNA序列的生物信息学分析
2.5基因芯片及数据分析
2.5.1基因芯片概念
2.5.2 技术原理
2.5.3基因芯片的制备
2.5.4基因芯片的应用
2.6研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法
2.6.1 酵母单杂交系统(可延伸双杂交)
2.6.2凝胶阻滞试验(Gel—shift)
2.6.3 DNaseⅠ足迹法
2.6.4噬菌体展示技术
思考题
参考文献
第3章基因工程的工具酶
3.1限制性内切核酸酶
3.1.1 限制性内切核酸酶的发现与种类
3.1.2 限制性内切核酸酶的命名
3.1.3 Ⅱ型限制性内切核酸酶的基本特性
3.1.4影响限制性内切核酸酶活性的因素
3.1.5 限制性内切核酸酶酶切DNA的方法
3.2 DNA连接酶
3.2.1 DNA连接酶的发现
3.2.2 DNA连接酶的种类
3.2.3黏性末端DNA片段的连接
3.2.4平末端DNA片段的连接
3.2.5 影响连接反应的因素
3.3 DNA聚合酶和反转录酶
3.3.1 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ及其应用
3.3.2 E.coli DNA聚合酶Ⅰ的Klenow大片段酶及其应用
3.3.3 T4噬菌体DNA聚合酶
3.3.4 T7噬菌体DNA聚合酶与测序酶
3.3.5反转录酶
3.4修饰酶类
3.4.1 末端脱氧核苷酸转移酶
3.4.2 T4多核苷酸激酶
3.4.3碱性磷酸酶
3.5其他工具酶
3.5.1 S1核酸酶
3.5.2 Bal 31核酸酶
3.5.3核酸外切酶
3.5.4 RNA酶
思考题
参考文献
第4章基因工程的克隆载体
4.1质粒载体
4.1.1质粒的一般生物学特性
4.1.2质粒DNA的复制与拷贝数的控制
4.1.3 质粒DNA的分离与纯化
4.1.4质粒载体的构建及类型
4.1.5重要的大肠杆菌质粒载体
4.1.6质粒载体的稳定性问题
4.2噬菌体载体
4.2.1 噬菌体的一般生物学特性
4.2.2λ噬菌体载体
4.2.3 单链DNA噬菌体载体
4.3柯斯质粒载体
4.3.1柯斯质粒载体的构建及其特点
4.3.2 柯斯克隆
4.3.3柯斯克隆的改良
4.4噬菌粒载体
4.4.1 噬菌粒载体的概念
4.4.2 pUC118和pUC119噬菌粒载体
4.4.3 pBluescript噬菌粒载体
4.5人工染色体克隆载体
4.5.1构建大容量载体的必要性
4.5.2人工染色体的必需成分
4.5.3酵母人工染色体载体
4.5.4细菌人工染色体载体
4.5.5 P1人工染色体
4.5.6人类人工染色体
4.5.7植物人工染色体
思考题
参考文献
第5章 目的基因的获取与改造
5.1 DNA的人工合成
5.1.1 人工合成DNA的原理
5.1.2 人工合成DNA的应用
5.2从基因文库获取目的基因
5.2.1基因组文库的构建与筛选
5.2.2 cDNA文库的构建与筛选
5.2.3基因组文库与cDNA文库的区别
5.3 PCR技术与目的基因的分离
5.3.1 目的基因的直接扩增和克隆
5.3.2 目的基因的cDNA的克隆
5.4电子克隆获取目的基因
5.4.1 电子克隆的基本原理
5.4.2利用EST擞据库进行电子克隆
5.4.3利用基因组数据库进行电子克隆
5.4.4全长cDNA的判断
5.5根据基因差异表达获得目的基因
5.5.1 mRNA差异显示技术
5.5.2 cDNA代表性差异分析
5.5.3抑制差减杂交技术
5.6 目的基因的改造
5.6.1基因突变与人工诱变技术
5.6.2基因定点诱变
5.6.3基因随机突变
思考题
参考文献
第6章 目的基因的导入与重组体的鉴定
6.1重组DNA向原核细胞的导入
6.1.1 原核受体细胞的种类及特点
6.1.2转化
6.1.3 重组质粒DNA分子转化大肠杆菌
6.1.4 重组入噬菌体DNA分子转导大肠杆菌
6.2重组DNA导入真核细胞
6.2.1 真核受体细胞
6.2.2 重组DNA分子导入酵母细胞
6.2.3 重组DNA分子导入植物细胞
6.2.4 重组DNA分子导入哺乳动物细胞
6.3重组体克隆的筛选与鉴定
6.3.1载体遗传标记筛选法
6.3.2依赖于重组子结构特征分析的筛选法
6.3.3核酸分子杂交检测法
6.3.4 免疫化学检测法
……
第7章外源基因的原核表达系统
第8章外源基因的真核表达系统
第9章转基因动物
第10章转基因植物
第11章基因治疗
第12章合成生物学与基因工程
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